Odonata的精子观察报告

引言

既然我们在实验课上观察了植物的花粉与子房，那么为何不观察自己的精子呢？(神秘言论)
于是Odonata开始了他的实验...
注意：本实验没有严格的定量控制与无菌处理，因此绝对的严谨性就谈不上了。不过作为参考我想还是可以的。
那么话不多说，我们开始

1. 准备

器材与试剂

• 光镜（4x,10x,40x,100x）
• 镊子
• 盖玻片
• 载玻片
• 擦镜纸
• 纸巾
• 胶头滴管/移液枪
• 生理盐水
• Adr ¹ 溶液（20μg/mL）
• Ach ² 溶液（10μg/mL）
• KCI溶液（1mol/L）
• 玻璃皿
• 新鲜离体精液样品（2-5ml）
• 香柏油（我使用折射率相近的茶油代替）

2. 实验过程

样本制备

空放行为，semen用玻璃皿接住。

样本观察

新鲜精液为凝胶状乳白色物质，挑取少量会拉出2cm细丝，为正常现象。有液化现象，在一定时间内（通常15-30min）由黏稠凝胶状态逐渐转变为液态。
[原理]：前列腺分泌的酸性磷酸酶和纤溶酶分解精液中的高分子蛋白。液化有助于提高精子活力，

涂片

精液静置30min后滴于载玻片上，类似血液涂片，如过于浓稠可加生理盐水稀释。

镜下观察

动态观察

观察与分析

可见蝌蚪样精子及其游动形态。头颈体尾分区明显，依靠鞭毛摆动进行运动。
根据100x物镜估算精子长度：100x物镜+10X目镜（10x/18）视野直径180μm，据比例尺量图可得单精子长度约为50-60μm，符合记载数据。
在40x物镜下估算精子数量（据figure2），通过计数得知此区域有精子约420个，视野直径为450μm，此区域面积约为0.16mm²，同时通过计算得出涂片大致厚度为0.15mm。则精子浓度约为(420/0.160.15)=2.110⁸/mL，略高于正常值。
注意：此为粗略估算。更准确的方法是要用血细胞计数器，也更伤眼睛

3. 探究实验

主题

探究Ach和Adr对于精子活跃程度的影响

实验设计

分四组，空白、滴加缓冲液（TE）、滴加Adr、滴加Ach，取用同一批样品，同时在一张载玻片上进行实验。（药品浓度在开头已给出）

猜想

空白组中有少量精子因时间推移而失活，滴加缓冲液组跟空白组情况类似。滴加Ach组的精子被抑制，而滴加Adr组的精子活性被促进。

实验过程视频

现象符合猜想

结论

Adr对于精子活动具有促进性，而Ach具有抑制性。（追求严谨需要更多实验）

现实依据

机制

Adr通过精子表面的α1-和/或β-肾上腺素能受体发挥作用。它激活精子内独特的可溶性腺苷酸环化酶（sAC），提高cAMP水平，进而激活蛋白激酶A（PKA），最终增强精子活力。

Footnotes

1. 肾上腺素 ↩

2. 乙酰胆碱 ↩